Bazı İlaçların İnsan Eritrosit Glutatyon Redüktaz Enzimi Üzerine in Vitro Etkilerinin İncelenmesi

Özet

Bu çalışma, insan eritrosit glutatyon redüktaz (GR) enziminin bazı ilaçlar üzerindeki in vitro etkilerini incelemektedir. GR enzimi, okside glutatyonun (GSSG) redükte glutatyon (GSH) formuna dönüşümünü katalizleyerek hücredeki antioksidan dengenin korunmasında kritik rol oynar. Çalışmada, askorbik asit, beloc, tylosin, prednol ve levoflaksasin gibi yaygın kullanılan ilaçların GR enzimi aktivitesi üzerindeki etkileri değerlendirilmiştir. Human kanından elde edilen eritrositler kullanılarak hemolizat hazırlanmış, ardından amonyum sülfat çöktürme ve 2',5'-ADP sepharose-4B afinite kromatografisi ile enzim saflaştırılmıştır. Saflaştırılan enzimin aktivitesi NADPH'nın absorbans değişimi ölçülerek tayin edilmiştir. Kinetik çalışmalar sonucunda beloc ve prednolun enzim aktivitesi üzerinde etkisi olmadığı, tylosin ve levoflaksasinin enzimi aktive ettiği bulunmuş; askorbik asidin ise enzimi inhibe ettiği belirlenmiştir. C vitamini için IC50 değeri 115,5 mM olarak hesaplanmış ve inhibisyonun yarışmasız tipte olduğu saptanmıştır. Ayrıca SDS-PAGE yöntemi ile saflaştırılan enzim tek bant olarak gösterilmiş ve molekül ağırlığı yaklaşık 58 kDa olarak belirlenmiştir. Bu sonuçlar, GR enziminin hücrede antioksidan rolü nedeniyle ilaçların bu enzim üzerinde farklı modülasyon etkileri olabileceğini ortaya koymaktadır. Çalışmada kullanılan ilaçların GR enzimi ile etkileşimlerinin detaylandırılması, oksidatif stres ve ilaç-toksisite mekanizmalarının anlaşılmasına katkı sağlayabilir.